Méthodes de détection de l'adn

La PCR et la PCR en temps réel sont les techniques les plus utilisées pour la détection de l'ADN. Toutes deux sont utilisées qualitativement pour identifier les substances allergènes dans les aliments en amplifiant une partie spécifique de la séquence d'ADN de l'espèce ou de l'allergène codant.

La détection des allergènes alimentaires par la technologie de détection de l'ADN est controversée, car ces méthodes ne détectent pas les allergènes cibles, mais des marqueurs d'ADN, et ces derniers peuvent n'avoir aucun rapport avec la teneur réelle en allergènes de l'aliment.

Des exemples de produits pouvant être à l'origine de cette situation sont le lait en poudre ou les œufs en poudre, qui sont des aliments formulés avec des composants riches en protéines.

Pour une analyse réussie à l'aide de ces techniques, plusieurs facteurs doivent être pris en compte, tels que la présence et la qualité des composés interférents dans la préparation de l'ADN, ainsi que la quantité d'ADN dans l'échantillon.

Les composants de l'analyse PCR sont généralement disponibles dans le commerce et faciles à développer, ce qui constitue un avantage par rapport à la technologie ELISA.

En outre, les tests ELISA ne sont pas disponibles pour certains allergènes réglementés tels que le céleri, la technologie PCR étant la seule option pour l'analyse et la détection.

Dans les aliments tels que la sauce tomate, où l'environnement est acide, l'ADN est très instable, ce qui constitue un inconvénient pour la détection par les techniques PCR. Dans de telles circonstances, les méthodes de détection basées sur la détection de protéines ou de peptides devraient être utilisées dans la mesure du possible.

Un autre facteur pouvant entraîner des résultats faussement positifs est la contamination croisée qui peut se produire dans les laboratoires, par contact du mélange PCR avec de petites quantités d'ADN cible provenant d'essais antérieurs.

Un autre inconvénient de ce type de technique est qu'elle peut détecter des composants allergènes dans un produit provenant du même animal, mais pas dans d'autres produits provenant du même animal. C'est le cas du bœuf allergène et du lait allergène, ou du poulet allergène et de l'œuf allergène, pour lesquels les tests PCR ne permettent pas de distinguer l'ADN de l'un de l'ADN de l'autre. L'œuf est un aliment qui, même s'il présente un potentiel allergène élevé dû à la présence de protéines spécifiques, ne doit pas être testé par des techniques PCR, car il présente de faibles niveaux d'ADN ou pas d'ADN du t